琼脂平板的制备(琼脂平板的制备方法)
陆桥平板是一种常用的计数琼脂培养基,用于微生物的培养和计数。以下是陆桥平板计数琼脂培养基的配制步骤:
1. 准备所需的材料和试剂:琼脂粉末、牛肉提取物、酵母提取物、葡萄糖、明胶、NaCl、Na2HPO4、KH2PO4、蒸馏水、自动吸水过滤纸、容量瓶、容量烧杯、试管等。
2. 在容量烧杯中加入适量的蒸馏水,并加热至沸腾。
3. 把适量的琼脂粉末加入沸腾的蒸馏水中,搅拌溶解。
4. 将溶解的琼脂液倒入干净的容量瓶中,冷却至50°C左右。
5. 在冷却的琼脂液中加入牛肉提取物、酵母提取物、葡萄糖、明胶、NaCl、Na2HPO4、KH2PO4等试剂,按照配方比例加入。
6. 用蒸馏水将容量瓶中的溶液加至适量体积,再次充分搅拌均匀。
7. 将琼脂培养基分装到试管或培养皿中(约15-20 mL),注意避免气泡产生。
8. 置于水浴中加热至煮沸,然后关闭火源。
9. 开启试管盖或盖子,稍微倾斜培养皿,待琼脂凝固。
10. 凝固后立即用自动吸水过滤纸吸去液面上的水分。
11. 若需保存,密封培养皿后在4°C冰箱中保存。
注意事项:
- 所有用于配制琼脂培养基的材料和设备应进行高温高压灭菌处理。
- 注意按照配方比例和操作步骤进行,以确保培养基质量和效果。
- 使用过程中,注意无菌操作,避免外界污染。
您好,陆桥平板计数琼脂培养基的配制步骤如下:
1. 准备所需原料:琼脂粉、蛋白胨、葡萄糖、氯化钠和磷酸二氢钾。
2. 称取适量的琼脂粉(一般为20g),加入适量的蒸馏水中,搅拌均匀。
3. 加热琼脂溶液,使其溶解。可以使用加热板或者水浴。
4. 在琼脂溶液中加入适量的蛋白胨(一般为10g),继续搅拌溶解。
5. 加入适量的葡萄糖(一般为5g)和氯化钠(一般为5g),继续搅拌溶解。
6. 加入适量的磷酸二氢钾(一般为1.5g),继续搅拌溶解。
7. 将溶液调至pH7.2-7.4,可以使用盐酸或者氢氧化钠进行调节。
8. 将溶液加热至沸腾,煮沸1-2分钟杀菌。
9. 将煮沸后的溶液倒入平板培养基容器中,并在平板表面均匀摇晃使培养基均匀分布。
10. 平板培养基凝固后,可以进行菌落计数或其他实验操作。
注意:在配制过程中要注意无菌操作,避免细菌污染。